島津固相萃取柱如果采用前述前處理方法對(duì)生物樣品進(jìn)行處理后，依然發(fā)現(xiàn)目標(biāo)組分受干擾比較嚴(yán)重，則建議采用更有效的前處理方法，就是固相萃取方法。固相萃取是一種包括液相和固相的萃取過程，是通過填料的鍵合官能基團(tuán)和待分離化合物之間的作用力，將目標(biāo)化合物與樣品基質(zhì)分離，以達(dá)到除去雜質(zhì)和富集目標(biāo)組分的目的，固相萃取小柱的種類較多，用于生物樣品凈化前處理的固相萃取填料。固相萃取柱的容量是指固相萃取柱填料的吸附量。對(duì)于以硅膠為基質(zhì)的固相萃取柱，其容量一般在1~5mg/100mg，也就是柱容量是填料質(zhì)量的1%~5%。而鍵合硅膠離子交換吸附劑填料的容量以meq/g表示，即每克填料的容量為X毫克當(dāng)量。這類填料的容量通常在0.5~1.5meq/g。
一、反相萃取柱操作
從極性基體中提取非極性的樣品
1、活化：以3—5毫升甲醇淋洗萃取柱;以3—5毫升去離子水(或緩沖液)淋洗萃取柱并保持萃取柱濕潤(rùn)；
2、上樣：以合適的流速使樣品均勻通過萃取柱；
3、清洗：以5毫升適當(dāng)極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱(常用的有純水,緩沖液,水/有機(jī)溶劑混合液)；
4、洗脫：將被測(cè)樣品,用1—5毫升非極性溶劑分批洗脫至收集容器。
在選擇固相萃取柱時(shí)，必須考慮柱容量。由于我們面對(duì)的樣品基質(zhì)通常都較為復(fù)雜，例如食品、生物樣品等等。在固相萃取中，固相萃取吸附劑對(duì)目標(biāo)化合物吸附的同時(shí)，也會(huì)吸附同類性質(zhì)的雜質(zhì)。因此，在考慮柱容量是應(yīng)該是目標(biāo)化合物加上可被吸附的雜質(zhì)總量不能超過柱容量。否則在載樣的過程中就可能有部分目標(biāo)化合物不能被吸附，造成回收率偏低。
更新時(shí)間：2022-03-01
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